（一）询问病史：对原发闭经患者应详细询问其母妊娠过程中有无急性传染病如风疹等病毒感染，有否接受激素或其它致畸药物、放射线等治疗。患者及其亲属生长发育过程中，有无性发育异常史。对继发闭经患者应了解月经情况，如初潮年龄，既往月经周期、经量，闭经期限，无周期性腹痛。有无手术切除子宫或卵巢史，有无全身慢性疾病如结核、营养不良以及甲状腺，肾上腺功能亢进或减退。有无精神刺激或生活环境改变等诱因，有否接受过激素治疗，药物种类、剂量、疗程、效果、末次用药时间，有否接受抗精神病药物等。已婚妇女尚需注意是否服过避孕药，有无粗暴或多次刮宫产后大出血史。另外还需注意有无毛发增加，肥胖、溢乳、头痛、视力改变等病史。
（二）体格检查
1.全身检查：注意一般发育及营养状况(精神神经类型)，智力发育，有无躯体畸形，必要是要测量身高，体重及指距，第二性征发育，有无肥胖、多毛、溢乳等。
2.妇科检查：注意外阴发育，有无阴蒂肥大等外阴畸形，阴毛的多少及分布。有无阴道，阴道，处女膜有无梗阻、畸形，子宫有无及大小，卵巢是否肿大等。
（三）特殊检查
由于闭经病因复杂，辅助特殊检查项目亦繁多，一般均应根据诊断步骤的深入，按需要加以选择。
1.下丘脑–垂体–卵巢–子宫轴激素功能试验：目的在于监测和评估生殖激素靶器官的功能状态，以确定闭经病理分区和原因并指导治疗。
(1)孕激素试验：目的是评估内源性雌激素水平和子宫内膜反应性，以鉴别闭经的程度及子宫或卵巢性闭经。黄体酮20mg／d肌注3～5天。停药观察撤血(撤药性出血)情况。有撤血者为阳性，说明有
一定的内源性雌激素分泌且子宫内膜反应性良好，并排除妊娠和子宫性闭经，可诊断为卵巢功能失调性闭经。无撤血者为阴性，说明内膜反应不良或内源雌素分泌不足以使内膜增生，故应在排除妊娠后
作雌激素试验。
(2)雌激素试验：目的检测子宫内膜反应性，以鉴别子宫性闭经和卵巢性闭经。乙烯雌酚1mg／d连服20天，或肌注苯甲酸雌二醇1mg／Qod共10次，停药观察撤血情况：也可应用孕酮撤血，即在应用雌
激素的最后4日加肌注黄体酮20mg／d，此实际上即为人工周期实验有撤血者试验阳性，说明缺乏内源性雌激素分泌而子宫内膜反应良好，此属为闭经，并可排院子官性闭经和妊娠，说明闭经在卵巢水平以上。无撤血者试验阴性说明子宫性闭经。
(3)促性腺激素试验：目的在于检测卵巢对促性腺激素反应性，以鉴别卵巢性和垂体性闭经。hMGl50U／d肌注10～14天，或pFSH75U／d10～14天，以观察卵泡发育情况和激素变化。有卵泡发育或排卵者为激素性闭经，反之为卵巢性闭经。重复大剂量仍无卵泡发育者为卵巢不敏感综合征。
(4)垂体兴奋试验：即GnRH试验，包括典型方法及Combes方法试验，目的在于检测垂体前叶对GnRH的反应性及LH两库存储备和释放功能，以鉴别下丘脑和垂体性闭经。正常反应是在静注GnRH后15～60分钟，LH值较注射前高2～4倍以上(经典型法）：或静滴后出现60分钟内LH上升及2～4小时内LH第二次上升的双相型分泌(Combes法）。正常反应提示垂体功能正常，闭经为下丘脑病变所致。迟缓或低平反应为垂体性闭经。需要注意的是垂体未完全破坏时仍可释放较多的LH，相反正常垂体在较长时间失去内源性GNRH的刺激，亦可出现惰性，因而需多次测定方可得出正确的结论。
(5)氯菧酚胺试验(clomiPhenetest)：目的检测HPO轴正、负反馈机转的完整性和功能状态，以鉴别下丘脑和垂体性闭经。试验阳性者提示下丘脑功能无损害，闭经病因在垂体：阴性者表明闭经为下丘脑功能失调。
(6)催乳素试验(pr01actintest)：即检测PRL、GH
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