主要依靠临床表现及细菌学检查。如果早期临床不能确诊，必要时可做活体组织检查。
放线菌侵入组织后，可引起组织坏死及形成脓肿，其中有放线菌颗粒（actinomycotisgranules）或称为“硫磺颗粒”（sulphurgranules），由菌体和菌丝组成，色淡黄，直径可达数百微米。镜下见嗜碱性不规则分叶体，中央部呈均一性，边缘部有辐射状分支细丝，细丝顶端常有胶体鞘膜，形成玻璃样杵状体。周围有大量中性多核白细胞环绕，再外周为上皮样细胞、巨细胞、嗜酸性细胞及浆细胞，最外层为致密的纤维结缔组织。
发病年龄主要在20～50岁，男性常为女性的2倍。
早期症状为涎腺局部出现无痛性小肿块，逐渐增大。检查发现腺体肿大，组织较硬，并有压痕，挤压腺体导管口无分泌物流出。肿块不活动，很快有脓肿形成，出现疼痛或热感，表面皮肤呈暗红或紫色，板状硬，与周围正常组织无明显界限。炎症继续发展，表面皮肤变软，脓肿逐渐破溃，流出淡黄色粘稠脓液。肉眼或取脓液染色检查，均可查见“硫磺颗粒”。破溃排脓后的炎症浸润灶，不久就在其周围又形成新的结节和脓肿，脓肿互相沟通，形成瘘道而转入慢性期，瘘管口有不整齐的肉芽组织。以后若伴有化脓性感染时，还可急性发作，出现急性蜂窝织炎的症状，体温高达38.5～39℃以上。这种急性炎症与一般炎症不同，虽经切开排脓，炎症可有好转，但放线菌病的局部板状硬肿胀不会完全消退。愈合后留下紫红色萎缩性疤痕。
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